使用顯微鏡測(cè)微尺測(cè)定微生物細(xì)胞大小的原理

微生物細(xì)胞的大小是微生物分類鑒定的重要依據(jù)之一。微生物個(gè)體微小，必

須借助于顯微鏡才能觀察，要測(cè)量微生物細(xì)胞大小，也必須借助于特殊的測(cè)微計(jì)在顯微鏡下進(jìn)行測(cè)量。

顯微測(cè)微計(jì)由鏡臺(tái)測(cè)微尺（stage micrometer）和目鏡測(cè)微尺（ocular micrometer）兩部分組成。

鏡臺(tái)測(cè)微尺是一塊中央有刻玻片（圖 2-7），刻度的總長(zhǎng)爲(wèi) l mm，等分爲(wèi)100 小格，每小格長(zhǎng) 10 μm，

專用于對(duì)目鏡測(cè)微計(jì)進(jìn)行標(biāo)定的。目鏡測(cè)微尺可直接用于測(cè)量細(xì)胞大小，它是一塊圓形玻片（圖 2-8），其中央有等分到度，測(cè)

量時(shí)將其放在接目鏡中的隔板上。目鏡測(cè)微尺刻度的總長(zhǎng)爲(wèi) l cm，等分爲(wèi) 100 小格，每小格長(zhǎng) 100 μm，

由于目鏡測(cè)微尺所測(cè)量的是微生物細(xì)胞經(jīng)過(guò)顯微鏡放大之后所成像的大小，刻度實(shí)際代表的長(zhǎng)度隨使用的目鏡和物鏡放大倍數(shù)及鏡筒的

長(zhǎng)度而改變，所以，使用前須先用鏡臺(tái)測(cè)微計(jì)進(jìn)行標(biāo)定，求出某一放大率下，目鏡測(cè)微尺每一小格所代表的長(zhǎng)度，然后用目鏡測(cè)微計(jì)直接測(cè)被測(cè)物件的大小。

一個(gè)目鏡測(cè)微尺刻度校正因子（calibration factor）的計(jì)算：一個(gè)目鏡測(cè)微尺刻度

（μ = 鏡臺(tái)測(cè)微尺上二重迭線間已知的距離 / 該二重迭線m）間目鏡測(cè)微尺的刻度

例 1: 假如二重迭線間已知的距離為 2 個(gè)鏡臺(tái)測(cè)微尺刻度（2 X 10 μ

m），對(duì)應(yīng) 13個(gè)目鏡測(cè)微尺刻度，則

每一目鏡測(cè)微尺刻度的校正因子 = 20 μm / 13 = 1.54 μm

例 2: 假如以顯微鏡目鏡測(cè)微尺觀察某一微生物，長(zhǎng)度為 5 個(gè)目鏡測(cè)微尺刻度，則

微生物長(zhǎng)度 = 目鏡測(cè)微尺測(cè)量的刻度數(shù) X 每一目鏡測(cè)微尺刻度的校正因子

= 5 X 1.54 μm = 7.70 μm